60例类风湿关节炎患者血清抗核周因子抗体的检测

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【摘 要 】目的 探讨可用于类风湿关节炎(RA)早期诊断的自身抗体.方法 对60例早期RA患者(RA组)、65例非RA性自身免疫性疾病患者(非RA组)和60例正常对照者(正常对照组)的血清APF和RF进行了测定比较.结果 RA组中APF阳性50例,阳性率83.3%.APF的特异性为100%,RF的特异性为86.2%.经统计学处理,APF的特异性显著高于RF的特异性(P<0.01).结论 APF是RA的特异性血清指标,对RA的早期诊断具有一定价值.

【关 键 词 】类风湿关节炎,核周因子,抗体

为了探讨可用于类风湿关节炎(RA)早期诊断的自身抗体,笔者对60例RA患者的血清抗核周因子抗体(APF)进行了检测分析,现报道如下.

1.资料与方法

1.1 一般资料RA组:60例早期RA患者,病程<2a,男16例、女44例,年龄32～71岁.非RA组:非RA性自身免疫性疾病患者65例,男15例、女50例,年龄33～70岁.正常对照组:60例健康体检者,男20例,女40例,年龄31～65岁.

1.2方法

1.2.1 APF检测采用间接免疫荧光法(1)清洁供者口腔后刮取脱落细胞,PBS洗涤3次,最后一次时加适宜浓度的胰蛋白酶消化10min,增加细胞膜通透性,调整适当细胞数,滴于涂有防脱片剂的玻片上,风干后待用.(2)被检血清样品用PBS缓冲液1:20稀释后,滴加到抗原片上,放置lh,用PBS缓冲液洗三次,每次5min,滴加稀释好的荧光素标记抗人IgG,室温放置30min,PBS洗三次,每次5min.用含溴化乙啶缓冲甘油封片.(3)在荧光显微镜10×40视野下观察5～l0个视野,颊粘膜上皮细胞的核被EB染成桔红色,在核的周围,即细胞质中出现大小不等圆形或椭圆形均质荧光颗粒为阳性,全片中阳性细胞大于5个判为APF阳性,3～5个判为可疑,小于3个为阴性.

1.2.2 RF检测采用乳胶凝集法血清1:20稀释,出现肉眼可见凝集为阳性.

1.3 统计学处理采用SPSS11.0统计学软件进行X2检验.

2.结 果

RA组中APF阳性50例,阳性率83.3%,RF阳性43例,阳性率71.7%,非RA组无APF阳性,RF阳性19例,阳性率29.2%,正常对照组无APF阳性,RF阳性1例,阳性率1.7%.因此,APF的特异性为100%,RF的特异性为86.2%.经统计学处理,APF的特异性显著高于RF的特异性(P<0.01).

3.讨 论

抗核周因子抗体(APF)是Nienhuis和Mandema在RA血清中发现的一种抗人颊黏膜细胞浆内角质蛋白颗粒的抗体,由于该抗体出现于细胞核周围故称其为抗核周因子,荧光显微镜下在胞浆内呈一个或多个大小不等的圆形或椭圆形颗粒.APF对RA诊断的特异性随血清稀释倍数的增加而增加,而敏感性则随之下降.目前研究最多的北欧人群APF诊断RA的特异性在95%以上,敏感性在49%～87%之间.国内各家报道亦有所差异,可能是由于血清稀释度不同造成的.有研究比较不同血清稀释度下APF检测结果,以正确诊断指数作为判断实验方法的优劣时,发现1:20为最佳血清稀释倍数[1].本文结果表明,对于诊断早期RA,APF的特异性为100%,RF的特异性为86.2%.APF的特异性显著高于RF的特异性(P<0.01).因此,APF是RA的特异性血清指标,对RA的早期诊断具有一定价值.

【参考文献】

[1] 李文倩,沈括,韩国雄.抗核周因子的检测及其在类风湿关节炎中的意义.青海医药杂志,2005,36(1):60-61.