本站原创该文为质粒类毕业论文模板范文,与人G6PDT279A和T279S两种突变子的体外构建相关论文致谢模板，可作为论文模板专业质粒论文写作研究的大学硕士与本科毕业论文开题报告范文和职称论文参考文献资料。免费下载教你怎么写质粒及突变及电泳方面的优秀学术论文范文。
摘 要 目的：构建葡萄糖6 磷酸脱氢酶（Glucose 6-phosphate dehydrogenase,G6PD）T279A和T279S两种突变子.方法：以GenbankNo X03674 为参考序列设计并合成引物、以含G6PD 基因的质粒（Philip J Mason 博士惠赠）为模板,PCR 扩增获得G6PD 野生型基因片段,琼脂糖凝胶电泳后回收PCR 产物,连接、转化构建克隆质粒pMD18T-G6PD；酶切pMD18T-G6PD质粒、电泳后回收目的基因片段,连接、转化构建含G6PD 野生型基因的重组质粒pAL-G6PD；设计并合成含有突变序列的引物,以pAL-G6PD 为模板,体外扩增获得G6PD835-海口（835A寅G,T279A）和835- 中国-1（835 A寅T,T279S）突变子.结果：酶切后经电泳鉴定表明获得与预期大小相符的pMD18T-G6PD质粒,EcoR I和Hind III双酶切获得与预期大小相符的pAL-G6PD,测序结果与参考序列完全一致.0.8%的琼脂糖凝胶电泳鉴定,并定量pAL-G6PD 单链DNA浓度约为200ng/uL.经测序鉴定并与参考序列比对结果表明获得了G6PD 的T279A 和T279S 两种突变子.结论：成功构建了G6PD 的T279A和T279S两种突变子,为下一步原核表达、生化性质以及酶动力学等研究奠定了基础.
关 键 词 ：葡萄糖6 磷酸脱氢酶；葡萄糖6 磷酸脱氢酶缺乏症；定点突变；聚合酶链反应