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摘 要 目的：构建及筛选高效率针对早期生长反应基因-1(Egr-1)进行RNA干扰(RNAi)的质粒.方法：根据Egr-1基因mRNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空载体pGCSIL-GFP中,构建重组质粒,同时设计构建不针对任何特异基因的质粒作为阴性对照.将shRNA表达质粒转染HEK293细胞.通过对GFP表达量的观察,荧光定量PCR及westem blotting定量检测Egr-1基因的表达,鉴定shRNA表达质粒对Egr-1的干扰效率.结果：针对小鼠Egr-l基因进行RNAi的3个序列中,有1个序列的干扰效率大于70％以上.结论：成功构建了1个针对小鼠Egr-1基因的高效RNAi表达质粒.
关 键 词 ：早期生长反应因子-1；RNA干扰；质粒
中图分类号：R399.14,R778文献标识码：A文章编号：1673―6273(2009)24―4621―04