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摘 要 目的：构建人WNT5A shRNA逆转录病毒表达载体.方法：根据人WNT5A基因删A序列设计并合成两条互补的DNA单链寡核苷酸,将退火后形成的双链连接于pSUPER Retro RNAi质粒,构建WNT5A shRNA逆转录病毒表达载体,经脂质体介导入GPG293细胞,包装成逆转录病毒.用该逆转录病毒感染人鼻咽癌细胞,Westem blot法和RT-PCR检测细胞WNT5A的表达.结果：目的序列成功连接于载体并包装成逆转录病毒,免疫印迹检测和RT-PCR检测结果表明构建的WNT5A shRNA逆转录病毒表达载体能显著抑制鼻咽癌细胞WNT5A的表达.结论：成功构建人WNT5A shRNA逆转录病毒表达载体.
关 键 词 ：WNT5A；RNA干扰；逆转录病毒载体
中图分类号：Q782文献标识码：A文章编号：1673―6273(2009)24―4652―04