DNA聚合酶iota在HEK293细胞中高表达体系的建立

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摘 要 目的:将带有DNA聚合酶iota(DNA Polymerase iota,Pol咨)目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1 转入HEK-293 细胞,建立DNA 聚合酶iota 在HEK-293细胞中的高表达体系,为进一步研究DNA聚合酶在DNA 损伤修复中的生物学功能奠定了基础.方法:用脂质体2000(Lipofectamine2000)将带有目的基因的真核表达质粒PCDNA3.1 转入HEK-293 细胞,通过G418 筛选抗性克隆,用一步法提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测出高表达克隆.结果:通过G418 筛选筛选出了具有G418 抗性的克隆,通过RT-PCR技术检测出高表达DNA 聚合酶iota 的HEK-293 细胞系.结论:建立了高表达DNA 聚合酶iota的HEK-293 细胞系,为进一步研究DNA 聚合酶在DNA 损伤修复中的生物学功能奠定了基础.


关 键 词 :DNA聚合酶iota,HEK-293 细胞,DNA 损伤,DNA 修复.

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