大鼠胚胎后肾间充质细胞的分离、培养鉴定

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摘 要 :分离、培养大鼠胚胎后肾间充质细胞(MMCS),取孕13d大鼠胚胎,分离胚胎肾脏,去除输尿管芽,消化后置37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养,倒置相差显微镜下观察培养细胞,并行HE染色、电镜观察、生长曲线测定:ABC免疫酶染色法检测波形蛋白、角蛋白、nestin、CD133、CD34;直接免疫荧光法检测双花扁豆凝集素(Dolichos Bmoms,DB),并流式细胞术定量检测,MMCS形态为成纤维细胞样,贴壁生长,48~72h达生长高峰:波形蛋白、nestin、CD133表达阳性;角蛋白、CD34、DB表达阴性;MMCS以DB标记后流式细胞检测为单峰,结果表明:培养细胞为后肾间充质细胞,纯度较高并符合干细胞特征.

关 键 词 :后肾;间充质细胞;原代培养;大鼠

中图分类号:R-332

文献标识码:A

文章编号:1007-7847(2008)01-0066-07

Isolation,Cultivation and Identification of Metanephric Mesenchymal Cells Derived from Embryonic Rats


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