心脏骤停后延迟复苏对大鼠海马病理变化的影响

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[摘 要 ] 目的 探讨心脏骤停后延迟心肺复苏对大鼠海马病理变化的影响.方法 成年雄性SD大鼠54只,随机分为假手术组（S组）、即刻复苏组（A组）,延迟复苏组（B组）,每组按血管穿刺后（S组）或自主循环恢复（ROSC）后（A组、B组）0.5 h断头取海马.A组、B组采用窒息法致大鼠心脏骤停和心肺复苏模型.光学显微镜下观察海马病理变化.结果 光镜下,S组海马神经元表现为细胞形态、分布正常,几乎无变性、坏死神经元；与S组比较,A组、B组海马神经元可见明显的细胞水肿、核固缩等病理改变,且B组比A组损伤更为严重.结论 延迟心肺复苏不仅降低心脏骤停大鼠ROSC成功率,亦可加重海马组织病理损伤.

[关 键 词 ] 心肺复苏；脑损伤；自主循环恢复

[中图分类号] R459.7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）04（a）-0022-02

虽然心脏骤停后心肺复苏研究不断深入[1],自主循环恢复（restoration of spontaneous circulation,ROSC）后脑功能的预后仍是难点问题[2],心脏骤停患者很难在第一时间得到救治,血流中断时间延长致使脑组织损伤加重.为更好接近临床并且保证大鼠心脏骤停模型成功率,本实验重点探讨心脏骤停后延迟3 min CPR 对大鼠病理损伤的影响.

1.材料与方法

1.1 动物、试剂、仪器

健康SD雄性大鼠54只,体重350-450g；MP50多参数监护仪（德国飞利浦）；HX-200S动物呼吸机（成都泰盟科技有限公司）.

1.2 实验方法

1.2.1 分组 随机数字表法将大鼠分为假手术组（S组,n等于18）；即刻复苏组（A组,n等于18）：窒息5±1 min后,常规复苏；延迟复苏组（B组,n等于18）：窒息8±1 min（心脏骤停后3 min）后常规复苏.

1.2.2 模型制作 本实验参考有关文献并加以改进[3].大鼠称重,3%钠（35 mg/kg）腹腔注射麻醉,仰卧固定.正中切口,暴露气管,行气管插管.剥离右侧股动脉,左侧股静脉,24G套管针向近心端穿刺置管后固定.连接压力换能器.连接心电肢体导联,至监护仪正常显示股动脉平均动脉压、心电图.伤口处敷蘸生理盐水纱布.稳定10 min后,呼气末气管夹闭诱导窒息致心脏骤停（CA）后,进行CPR：开放气道,接小动物呼吸机（呼吸频率80 次/min,潮气量6 ml/kg）,同时经股静脉推注肾上腺素20 μg/kg.

1.2.3 CA标准 心电图呈室颤、停搏或电机械分离,股动脉平均动脉压<25 mmHg[4]；动物皮肤粘膜明显发绀.

1.2.4 ROSC标准 心电图呈自主节律,股动脉平均动脉压≥60 mmHg[4],持续时间超过10 min；动物皮肤粘膜发绀明显减轻.

1.2.5 标本留取 S组按血管穿刺后0.5 h断头取脑；A组、B组按ROSC后0.5 h断头取脑.

1.2.6 检测方法 低温冰台上断头剥离海马后,于4%多聚甲醛中固定至少24 h.脱水、透明、浸蜡及包埋,海马组织5 um厚切片,HE（Hematein Eosin）染色.

1.2.7 统计学方法 数据采用SPSS17.0统计软件分析.组间ROSC成功率比较用χ2检验,P<0.05有统计学差异.

2.结果

2.1 ROSC成功率

S组成功率100%,A组成功率88.9%,B组成功率50%；B组与A组比较,ROSC成功率明显下降（P<0.05）.

2.2 各组大鼠海马组织病理观察

S组：海马神经元表现为细胞形态、分布、间隙正常,几乎无变性、坏死神经元（图1）；A组：海马神经元有部分变性、坏死,病理损伤较重（图2）；B组：海马神经元细胞出现明显的胞核凝固、深染,胞浆溶解,存在较多坏死神经元,病理损伤比A组更重（图3）.

3.讨论

学者们[5]对心肺复苏ROSC患者预后相关因素进行分析,薛继可[6]对725例CPR患者进行分析,发现CPR开始时间≤5 min的460例患者ROSC为140例（30.4%）,CPR开始时间>5 min的265例患者ROSC仅为47例（17.7%）.廖红[7]采用窒息法制作CA大鼠模型,在20只大鼠CA后即刻进行复苏,复苏成功率约为70%,本实验中,A组即刻复苏的复苏成功率为88.9%,可能由于实验条件、生理盐水以及肾上腺素的使用不同,导致实验中的复苏成功率存在一定差异.本实验B组大鼠复苏成功率为50%,与A组比较复苏成功率明显降低（P<0.05）,这再次证明了心脏骤停持续时间是决定ROSC的关键因素之一,临床上只有真正缩短开始心肺复苏的时间,才有可能根本上改善复苏的预后.

大脑细胞尤其是海马等组织在ROSC早期仍处于相对低灌注或再灌注损伤阶段,此期大鼠海马组织已经发生了明显的病理变化.观察病理形态学改变, B组大鼠海马病理损伤较A组更为严重,其机制可能与缺血时间延长、缺血-再灌注损伤加重、钙超载、兴奋性氨基酸释放增多等有关.

该实验表明延迟复苏不仅能降低ROSC成功率,还能加重海马组织病理损伤,因此,临床上应争分夺秒地对CA患者实施CPR,尽快使脑组织恢复血供,真正改善ROSC患者的预后.

[参考文献]

[1] Hel C, Schreiber W, Trimmel H. Quality of closed chest pression on a manikin in ambulance vehicles and flying helicopters with a real time automated feedback[J]. resuscitation, 2010, 81（1）：59-64.

[2] Nichol G, Aufderheide TP, Eigel B, et al. Regional systems of care for out-of-hospital cardiac arrest：A policy statement from the American Heart Association[J]. Circulation, 2010, 121（5）：709729.

[3] 马宇洁,杨兴易,林兆奋等,心肺复苏后大鼠血清神经元特异性烯醇化酶、S100B蛋白对脑损伤诊断的价值[J].中华急诊医学杂志,2006,15（4）：335-337.

[4] Idris AH,Becker LB,Ornato JP,et al. Utstein-style guidelines for uniform reporting of laboratory CPR research [J]. Circulation,1996,94（9）：2324-2336.

[5] 丁,谢娟.心肺复苏自主循环恢复患者预后相关因素分析[J].实用医学杂志,2012,28（23）：3956-3959.

[6] 薛继可,冷巧云,高玉芝等.急诊科心搏骤停患者心肺复苏预后的影响因素[J].中华急诊医学杂志,2013,22（1）：28-34.

[7] 廖红,倪新莉,井蕊等.肝素对心肺复苏大鼠脑损伤的影响[J].宁夏医学杂志,2010,32（10）：873-874.

（收稿日期：2013-12-28）