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中图分类号：R446 文献标识码：B 文章编号：1004-7484（2012）01-0134-02
痰涂片查找抗酸杆菌是临床诊断肺结核的重要指标,对比X光线检查,其方法相对简单可行,并且容易标准化,因此在结核病控制工作中,实验室的痰检质量起着非常重要的作用.本文通过对本院实验室痰涂片查找抗酸杆菌所遇到的实际问题进行分析,总结出为确保检验结果的准确性,对痰涂找抗酸杆菌检查的全过程进行质量控制是非常必要的.抗酸杆菌的检测包括前、中、后三个阶段的质量控制.
1.抗酸杆菌检测前的质量控制
抗酸杆菌检测前阶段的质量控制是确保结果准确可靠的先决条件,但也是临床最容易忽略和出现问题或偏差的过程.从医生提出检验申请、患者准备、样本的采集和保存及运送都应该采取相应的措施,这是做好抗酸杆菌检测的前提条件.
1.1 标本的采集.对肺结核患者、疑似肺结核患者、肺结核可疑症状者均应进行痰涂片检查.应采集3个合格的痰标本.①即时痰,就诊时深呼吸后咳出的痰液.②晨痰,患者晨起立即用清水漱口后咳出的第2、3口痰.③夜间痰,送痰前1天晚间咳出的痰.留取的痰标本性状应为脓样、干酪样及脓性黏液样痰为合格,防止唾液的混入.
1.2 标本的保存及运送.收取标本如不能立即涂片,应将标本4℃保存,如需送上级实验室鉴定的痰标本须在收到3天内4℃保存运送.
2.抗酸杆菌检测中的质量控制
全面分析实验的不确定因素是抗酸杆菌检测质量控制的基本条件,为了确保检验结果的准确可靠,应严格管理确保仪器设备的正常运转,保证试剂无沉淀且在规定的有效期内使用.
实验室收到标本后,认真做好双核对,并把痰标本进行编号做好登记.用折断的竹签茬端挑取痰标本中干酪样、脓样或可疑部分于玻片均匀涂抹成（10×20）mm的卵圆形厚薄均匀的痰膜,自然干燥后加热固定,滴加石碳酸复红盖满玻片,加热至出现蒸汽后停止,保持染色5分钟,用酸性酒精脱色至肉眼无可视红色,再加亚甲蓝复染30秒,自然干燥后用油镜连续观察300个视野,再根据分级标准报告抗酸杆菌阴性、疑似、3～8条/300视野、抗酸杆菌1+、2+、3+、4+.
3.抗酸杆菌检测后的质量控制
患者标本检测结果的发出直至临床应用这一阶段,是检测工作质量控制的最后一个环节,也是保证检验结果准确可靠的重要环节.
3.1 认真核对登记本上的登记号、标本盒上的标签、玻璃涂片上的编号,与化验单完全相符后方可发出报告单.
3.2 影响痰涂片阳性检出率的因素
3.2.1 试剂中如果有沉淀一定要过滤后使用,以免影响涂片质量而导致涂片结果的不准确.
3.2.2 标本是否合格.确认标本是合格的痰标本而非唾液,因为经过多年的总结和分析,唾液的检出率非常低,而脓样、干酪样及脓性黏液样痰、褐色痰或含少量新鲜血液的血痰,其阳性检出率较高,并且与同行统计的结果相符合［1].为了保证结果的准确性和可靠性,要求门诊医生告知初诊患者留取合格痰标本的方法,保证其提供的痰标本是从肺部深处咳出的黏性或脓性痰.
3.2.3 通过对痰检工作的总结分析,不同时间段痰标本的检出率为：夜间痰的检出率最高,其次是晨痰,即时痰的检出率最低.因此要求患者送检标本时一定要求送3份痰标本.
3.2.4 涂片厚薄要适宜.太薄容易脱色过重,太厚脱色不彻底,都易造成结果的不准确.
3.3 通过室内质控和室间质控来保证本实验室常规工作质量及实验的准确性.
4.讨论
2000年以前,本院结核病门诊痰菌检查中,阳性检出率较低,近年来通过对痰涂片检测的质量管理和质量控制,痰中抗酸杆菌的检出率大大提高.
2010年全年本院结核病门诊查痰的疑似肺结核患者495例,其中即时痰阳性率占9,清晨痰阳性率占20.7,夜间痰阳性率占24.8,清晨痰和夜间痰的检出率均高于即时痰,涂阳率与文献报道接近［2].主要是由于受检者痰中唾液占的比例较大所造成的.
按照标本的性状统计分析,干酪样痰阳性率占27.1,血痰阳性率占25.6,黏液痰阳性率占6.2,唾液痰阳性率占2.5,涂阳率与文献报道接近［3].主要是由于干酪样痰和血痰大部分来自于晨痰和夜间痰.
总之,为了保证患者痰标本检测结果的质量,必须认真做好痰涂片检测的全程质量控制,保证检测结果的准确性和可靠性.