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摘 要 ：设计一对３′端互补、５′端带酶切位点的引物,用ＰＣＲ扩增唾液富组蛋白５（Ｈ５）基因（ｈ５）,将载体ｐＧＥＸ４Ｔ－２和ｈ５双酶切、连接、转化ＤＨ５α,将筛选鉴定的重组质粒ｐＧＥＸ４Ｔ－２-ｈ５转化ＢＬ２１（ＤＥ３）.诱导重组菌ＢＬ２１（ＤＥ３）－ｐＧＥＸ４Ｔ－２－ｈ５表达,纯化融合蛋白ＧＳＴ－Ｈ５,用Thrombin切去ＧＳＴ标签获取重组Ｈ５（ｒＨ５）,测试rH5抗白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）活性.试验成功构建了重组载体ｐＧＥＸ４Ｔ－２－ｈ５,在３７ ℃重组菌ＢＬ２１（ＤＥ３）－ｐＧＥＸ４Ｔ－２－ｈ５生长至ＯＤ６００ ｎｍ＝０．６时用１ ｍｍｏｌ／Ｌ ＩＰＴＧ于２０ ℃诱导９ ｈ,可获得高水平表达的融合蛋白GST-H5；酶切后获得的ｒＨ５对白色念珠菌生长有较强的抑制作用,ｒＨ ５产率约２ ｍｇ／Ｌ.
关 键 词 ：唾液富组蛋白５（Ｈ５）；融合蛋白ＧＳＴ－Ｈ５；原核表达；白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）
中图分类号：Q78文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０12）08－1696-03