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摘 要 ：目的 表达融合2种具有对虾抗菌肽活性的新型抗菌肽.方法利用overlap-PCR连接并扩增对虾抗菌肽Penaeidin-3和Penaeidin-4的嵌合基因序列,定向插入原核表达载体pET_28a(+)中,构建此嵌合基因的表达质粒.将表达质粒转化至E.coli BL21(DE3),经终浓度1.O mmol/L IPTG分别在37℃和15℃诱导表达4 h和14 h,SDS-PAGE分析嵌合蛋白质的表达,用抑菌圈法测定产物的抑菌活性.结果获得了含有Penaeidin-3和Penaeidin-4嵌合基因的表达质粒；18％SDS-PAGE电泳显示,大肠杆菌中表达的嵌合蛋白质相对分子质量约14.7×103,主要以包涵体形式存在,包涵体15℃的表达量高于37℃的表达量；包涵体复性后,对枯草杆菌和溶藻弧菌具有明显的抑菌活性.结论实现了2种对虾抗菌肽嵌合基因在大肠杆菌中的表达.
关 键 词 ：对虾抗菌肽；重叠PCR；嵌合基因；大肠杆菌；蛋白质表达