siRNA抑制cmyc基因的表达对宫颈癌细胞增殖的影响

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摘 要 目的:利用siRNA(all interference RNA)技术研究c-myc 基因的对宫颈癌HeLa 细胞增殖的影响.方法:依据Promega 公司在网上提供的设计软件,设计针对c-myc 基因的siRNA,合成DNA 模板,体外转录合成siRNA.通过阳离子聚合物jet-SITM-ENDO 将合成的siRNA转染入HeLa 细胞,以未转染细胞以及错义序列siRNA-scr 转染细胞为对照.用细胞计数法检测siRNA 对HeLa 细胞增殖的影响.流式细胞法检测细胞周期及蛋白表达的变化,RT-PCR 法比较转染前后c-myc mRNA 表达水平的变化.结果:细胞计数法结果显示,转染24 h后c-myc 基因siRNA明显抑制MCF-7 细胞增殖,转染48 h 后,抑制效率稳定.c-myc 基因siRNA 转染后能有效地抑制HeLa 细胞的增殖,阻滞细胞周期于G0/G1 期,siRNA 转染组c-myc mRNA、蛋白的表达量明显低于空白对照组、错义序列组.结论:体外转录合成的siRNA 可有效降低HeLa 细胞c-myc 基因的表达,抑制细胞增殖.


关 键 词 :siRNA;基因;c-myc;HeLa 细胞

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