7株不同原核质粒表达丙型肝炎核心蛋白的差异

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[摘 要 ] 目的 通过比较不同原核质粒表达丙型肝炎核心蛋白（CORE）的差异,筛选出能高效表达CORE的原核质粒.方法 用PCR扩增并获得CORE基因,扩增产物分别构建到7种不同原核表达质粒中,重组质粒用IPTG诱导表达,聚丙烯凝胶电泳（SDS-PAGE）初步鉴定表达产物,并经Western blot验证. 结果 PCR及双酶切验证表明CORE基因成功构建到7种原核质粒中,SDS-PAGE验证各融合质粒表达目的蛋白存在差异,其中pTrc-CKS-CORE及Pmbp-C-CORE可见相应的融合蛋白表达,以pTrc-CKS-CORE表达量高,表达产物经Western blot验证表达成功. 结论 成功构建7株不同CORE原核表达质粒,各融合质粒表达CORE存在较大差异,筛选出高表达CORE质粒,为下一步研究奠定基础.

[关 键 词 ] 丙型；肝炎病毒核心蛋白；质粒构建

[中图分类号] R512.6 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2012）33-0009-04