金银花生产质量控制技术

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金银花,又名忍冬花,具有清热解毒、疏散风热的功效,是最常用的中药之一.其名始见于《本草纲目》忍冬项下.忍冬始载于《名医别录》,列为上品.2005版《中国药典》将灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides Hand.-Mazz、红腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq或华南忍冬Lonicera confusa DC.列于山银花Flos Lonicerae名下,以有别于金银花Flos Lonicerae japonicae.

1.金银花的化学成分

1.1挥发油

金银花中的挥发油是其疏散风热主要物质基础之一.研究学者主要应用气-质联用（GC-MS）技术,从干花、鲜花成分比较、不同来源样品、不同提取方法、不同药用部位等对金银花挥发油成分进行了分析和测定.

1.2黄酮类

黄酮类化合物有抗菌抗病毒的药理作用,其中木犀草素- 7-0-β-D-半乳糖苷已作为2005版《中国药典》中金银花Flos Lonicerae japonicae的一个质量控制指标.研究者通过色谱分离和光谱鉴定的方法,对忍冬和山银花中的黄酮类化合物进行了确定.

1.3有机酸、醇、酯类

有机酸类被认为是金银花清热解毒的药理基础,目前常以绿原酸作为金银花的质量控制指标.研究人员开始转向同属的细毡毛、山银花等未涉及领域.

1.4皂苷类

柴氏等]从山银花乙醇提取物的正丁醇萃取部分中分离得到7个常春藤皂苷类化合物,其中常春藤皂苷元-28-O-β- D-吡喃葡萄糖基（6→1）-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯（Ⅰ）为首次从忍冬属植物中分离得到,常春藤皂苷元-3-O-β-a-L-吡喃阿拉伯糖基（2→1）-a-L-吡喃鼠李糖基-（3→1）-O-D-吡喃葡萄糖苷（Ⅲ）、常春藤皂苷元-3-O-a-L-吡喃阿拉伯糖基（2→1）-O-a-L-吡喃鼠李糖基-（3→1）-O-β-D-吡喃葡萄糖基（4→1）-0-β-D-吡喃葡萄糖苷（Ⅳ）在忍冬属中仅见水解产物,其它均系从该植物中首次分离得到.

1.5环烯醚萜苷类

2.生产质量控制

质量控制方面的研究多集中于不同品种、不同产地金银花有效成分的含量测定, 并越来越倾向于同时测定多种成分.GC、GC-MS、HPLC和核磁共振的指纹图谱方面也有了初步探索.认为HPLC和GC指纹图谱方法可用于金银花药材、提取物品质及其伪品的鉴定.

2.1有效成分的含量测定

王氏等采用高效液相色谱梯度洗脱法同时测定了金银花中绿原酸、咖啡酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸含量,并对4个产地3种金银花中上述3种化合物进行定量分析.结果西南地区金银花药材主流商品灰毡毛忍冬、细毡毛忍冬干燥花蕾中绿原酸、咖啡酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸含量高于山东、河南产金银花.白氏等采用HPLC测定四地产金银花药材中绿原酸的含量,并与对照药材相比,结果对照药材中绿原酸含量为25.84mg/g,山东省为24.10mg/g,河北省为24.48mg/g,河南省为23.10mg/g,安徽省为22.08mg/g.认为金银花中绿原酸含量测定可以作为判定金银花药材品质的指标之一.黄氏等用HPLC分析方法,同时测定金银花不同种（忍冬、山银花、红腺忍冬、灰毡毛忍冬、细毡毛忍冬）中芦丁、金丝桃苷、木犀草素-7-O-β-D半乳糖苷、忍冬苷、苜蓿苷、金圣草素-7-O-新橙皮糖苷、苜蓿素-7-O-新橙皮糖苷、槲皮素8种黄酮的含量.结果线性范围内8个黄酮化合物的标准曲线呈良好的线性关系,芦丁在忍冬和山银花中含量高,而在红腺忍冬中痕量存在,甚至在细毡毛忍冬检测不到.相反,芦丁、木犀草素-7-O-β-D-半乳糖苷和忍冬苷在忍冬中含量相对较高（>100μg/g）,而山银花中含芦丁、木犀草素7-O-β-D半乳糖苷相对较高；而红腺忍冬、灰毡毛忍冬、细毡毛忍冬中只有木犀草素-7-O-β-D-半乳糖苷的含量较高.

2.2指纹图谱的研究

指纹图谱是目前提出的最符合中药自身特点的质量控制方法,在其可行性方面已有了不少探索.田氏等以芳樟醇为参照物,采用GC法对11批忍冬Lonicera japonica Thunb.花蕾进行分析,找出特征指纹峰,建立了GC指纹图谱,获得24个共有指纹峰.王氏等应用GC色谱法建立了鱼金注射剂（鱼腥草、金银花）的指纹图谱,结果注射剂标准GC指纹由17个特征峰组成,并对不同批注射剂进行了相似度比较,相关系数的RSD小于2%.王氏等[还应用GC法建立了金银花的指纹图谱,利用相似度计算软件,建立了药材GC指纹图谱共有模式,并对不同批药材进行了相似度的比较.阳氏等以绿原酸为参照物,用HPLC方法建立金银花甲醇提取物的指纹图谱,药材有15个共有峰,其参数符合“中药注射剂指纹图谱技术要求”的有关规定.

刘氏等采用HPLC梯度洗脱法,确定了金银花药材有11个共有峰,认为此方法可靠,可为提高金银花药材质量控制标准提供参考.冯氏等以绿原酸为参照物,应用HPLC分别对忍冬药材、提取物各批样品进行检测,得出的指纹图显示,药材、提取物均有6个共有峰.白氏等采用HPLC法获得色谱指纹图谱,据此图谱对金银花质量进行分析,得出的结果是：山东、河北、河南、安徽4个产地金银花指纹图谱主要特征大致相同,金银花主要成分之一绿原酸含量与对照药材相比无显著性差异（P>0.05）,产地金银花品质与对照药材基本相同.王氏等采用254 nm检测波长,采用醋酸-甲醇线性梯度洗脱法,建立了忍冬药材Flos Lonicerae.Japonica的HPLC指纹图谱,10个样品中得到11个特征指纹峰.林氏等]建立了山东产金银花乙醇提取物HPLC和核磁共振（NMR）的指纹图谱,认为NMR指纹法可作为中成药内在化学成分特征及相对之间含量的差异检测手段.

3.讨论

目前,金银花化学成分的研究领域已经扩展到不同品种,而且不断有新的化学成分在金银花中被发现.化学成分的深入研究为金银花的质量控制提供了依据.

在金银花的质量控制方面,有效成分含量测定已经有了比较成熟的方法,金银花的指纹图谱也有了初步探索,但依然停留在学术方面,并没有建立起鉴别真伪和判断质量优劣指纹图谱的数据库和配套分析软件并应用到实际商品检验的质量控制中.

应用数理统计和计算机检索、计算功能统计各样品中各成分含量的分布关系,从而建立具有各样品抽象特征的中药材、提取物及制剂的指纹图谱,使GC或HPLC等指纹图谱与化学成分、成分含量及各成分药效建立相应的量化关系都是有待探索和研究的课题.

【参考文献】

[1]张守平,辛宁,王柳萍.金银花化学成分及质量控制研究进展,论文网,2011,05.